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索萊寶 CCK-8試劑盒細胞增殖及毒性檢測

產(chǎn)品貨號:CA1210
產(chǎn)品名稱:CCK-8試劑盒(細胞增殖及毒性檢測試劑盒)
產(chǎn)品規(guī)格:100T/500T/1000T/10*500T/10*1000T
產(chǎn)品簡介:
索萊寶 CCK-8試劑盒細胞增殖及毒性檢測

  • 產(chǎn)品型號:CA1210
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2024-11-14
  • 訪  問  量:1689
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聯(lián)系電話:13269192980

詳細介紹
品牌SOLARBIO/索萊寶貨號CA1210
規(guī)格100T/500T/1000T/10*500T/10*1000T供貨周期現(xiàn)貨
主要用途細胞增殖及毒性檢測試劑盒

Solarbio/索萊寶  CA1210  CCK-8試劑盒(細胞增殖及毒性檢測試劑盒)

 

索萊寶  CCK-8試劑盒細胞增殖及毒性檢測

產(chǎn)品貨號:CA1210

產(chǎn)品名稱:CCK-8試劑盒(細胞增殖及毒性檢測試劑盒)

產(chǎn)品規(guī)格:100T/500T/1000T/10*500T/10*1000T

產(chǎn)品簡介:

CCK-8試劑盒(細胞增殖及毒性檢測試劑盒)

 

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準

規(guī)格:10*1000T ; 10*500T ; 1000T ; 100T ; 500T

儲存條件:4℃密封避光

Cell Counting Kit-8 簡稱CCK-8 試劑盒,為MTT 法的替代方法,是一種基于WST(水溶性四唑鹽,化學名:2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的廣泛應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒??捎糜谒幬锖Y選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏等試驗。

使用說明:
一、制作標準曲線(測定細胞具體數(shù)量時 (測定細胞具體數(shù)量時)
1
、先用細胞計數(shù)板計數(shù)所制備的細胞懸液中的細胞數(shù)量,然后接種細胞。
2
、按比例依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個細胞濃度梯度,一般要做 3-5 個細胞濃度梯度,每組 3-6 個復(fù)孔。
3
、接種后培養(yǎng)至細胞貼壁,然后加 CCK-8 試劑培養(yǎng)一定時間后測定 OD 值,制作出一條以細胞數(shù)量為橫坐標(X 軸),OD 值為縱坐標(Y 軸)的標準曲線。根據(jù)此標準曲線可以測定出未知樣品的細胞數(shù)量(試用此標準曲線的前提是實驗的條件要一致,便于確定細胞的接種數(shù)量以及加入 CCK-8 后的培養(yǎng)時間。)

二、細胞活性檢測

1、在 96 孔板中接種細胞懸液(100µL/孔)。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)(在 37℃,5% CO2 的條件下)。

2、向每孔加入 10µL CCK-8 溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響 OD 值的讀數(shù))。

3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育 1-4 小時。

4、用酶標儀測定在 450nm 處的吸光度。

5、如果暫時不測定 OD 值,打算以后測定的話,可以向每孔中加入 10µL 0.1M HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在 24 小時內(nèi)吸光度不會發(fā)生變化。

三、細胞增值-毒性檢測

1、在 96 孔板中配置 100 µL 的細胞懸液。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng) 24 小時(在 37 ℃,5% CO2 的條件下)。

2、向培養(yǎng)板加入 10µL 不同濃度的待測物質(zhì)。在培養(yǎng)箱孵育一段適當?shù)臅r間(例如:6、1224 48 小時)。

3、向每孔加入 10 µL CCK-8 溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響 OD 值的讀數(shù))。如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性的話,可在加 CCK-8 之前更換新鮮培養(yǎng)基(除去培養(yǎng)基,并用培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,然后加入新的培養(yǎng)基),去掉藥物影響。

4、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育 1-4 小時。

5、用酶標儀測定在 450 nm 處的吸光度。

6、如果暫時不測定 OD 值,打算以后測定的話,可以向每孔中加入 10µL 0.1M HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在 24 小時內(nèi)吸光度不會發(fā)生變化。

活力計算:.

細胞活力(%)=[A(加藥)A(空白)][ A(0 加藥)A(空白)]×100

A(加藥):具有細胞、CCK-8 溶液和藥物溶液的孔的吸光度

A(空白):具有培養(yǎng)基和 CCK-8 溶液而沒有細胞的孔的吸光度

A0 加藥):具有細胞、CCK-8 溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度

細胞活力:細胞增殖活力或細胞毒性活力

注意事項:

建議先做幾個孔摸索接種細胞的數(shù)量和加入 CCK-8 試劑后的培養(yǎng)時間。

白細胞可能需要培養(yǎng)較長時間。

當使用標準 96 孔板時,貼壁細胞的最小接種量至少為 1 ,000 / (100 µL 培養(yǎng)基)。檢測白細胞時的靈敏度相對較低,因此推薦接種量不低于 2,500 / ( 100 µL 培養(yǎng)基)。如果要使用 24 孔板或 6 孔板實驗,請先計算每孔相應(yīng)的接種量,并按照每孔培養(yǎng)基總體積的 10% 加入 CCK-8 溶液。

如果沒有 450nm 的濾光片,可以使用吸光度在 430-490 nm 之間的濾光片,但是 450nm 檢測靈敏度最高。

培養(yǎng)基中酚紅的吸光度可以在計算時,通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不會對檢測造成影響。


索萊寶  CCK-8試劑盒細胞增殖及毒性檢測 

產(chǎn)品訂購信息:

CA1210  CCK-8試劑盒(細胞增殖及毒性檢測試劑盒)  100T/500T/1000T/10*500T/10*1000T

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